<<
>>

Исследование общетоксического действия in vivo на лабораторных животных

Для установления характера и степени выраженности общетоксического действия наноразмерных частиц серебра, цинка и титана диоксида проводились токсикологические исследования на

экспериментальных животных по определению острой токсичности при однократном внутрижелудочном введении.

Изучение общетоксического действия позволяет определить переносимые и токсические дозы и выявить наиболее чувствительные к исследуемому веществу органы и системы организма, характер и степень патологических изменений [23].

Эксперимент проводился в соответствии МУ 1.2.2520-09, т.к. данные методические указания устанавливают требования к проведению токсиколого-гигиенических исследований по оценке безопасности НМ, в том числе на лабораторных животных при осуществлении государственной регистрации наносодержащей продукции, обращающейся на территории РФ и других стран ЕврАзЭС. Кроме того, проведение данных исследований определяется правилами надлежащей лабораторной практики (НЛП).

Для изучения острой токсичности использовали нелинейных мышей (отдельно самцов и самок) с исходной массой тела 18-24 г. (240 животных). Эксперимент проводился в соответствии с «Правилами лабораторной практики» (Приказ Минздравсоцразвития РФ от 23 августа 2010 г. №708н). Все животные содержались при 12-ти часовом цикле освещения, температурном режиме 20-26 ºC, влажности воздуха 50-65 %, 8-10-ти кратной смене объема воздуха комнаты в час, получали полусинтетический рацион в соответствии с суточными нормами кормления (Приказ министра здравоохранения от 10 марта 1966 г. № 163). Животных акклиматизировали в условиях лаборатории в течение 10 дней до начала эксперимента.

Исследуемые вещества вводили в желудок через 3 часа после кормления в нативном виде или в водном растворе. Вводимый объем для белых мышей – 1 мл. Кормление животных проводили через 3 часа после введения веществ.

Схема проведения экспериментов по изучению общетоксического действия НМ на теплокровных представлена в табл. 3

Таблица 3 Схема проведения эксперимента по изучению общетоксического

действия НМ на млекопитающих

Вид животных Линейные или беспородные белые мыши (отдельно самки и самцы)
Продолжительность

эксперимента

14 дней
Карантин Не менее 10 дней
Исходная масса тела 18 - 24 г

Рацион

Пищевая и биологическая ценность

рациона полностью удовлетворяет физиологические потребности животных

Количество животных в группе в

начале эксперимента

ориентировочно с учетом возможной

гибели не менее 60

Условия содержания

Животные получают свободный доступ

к корму и воде и содержатся в отапливаемом, вентилируемом помещении в соответствии с установленными требованиями.

Содержание животных Не более чем по 5 животных в клетке

Исследуемые показатели

-гибель животных (клиническая картина

интоксикации и гибели, характер двигательной активности и походки, наличие и характер судорог и др.), при этом у всех погибших животных проводятся макроскопическое и микроскопическое исследование внутренних органов

- общее состояние животных: внешний вид, поведение, двигательная активность, состояние шерстного покрова (каждые 2 дня)

- поедаемость корма (ежедневно)

- масса тела (1 раз в неделю)

- абсолютная и относительная масса внутренних органов (печень, почки, надпочечники, селезенка, сердце, легкие, тимус, гипофиз, головной мозг семенники, простата и другие при необходимости) – после окончания эксперимента

Оценка общетоксического действия проводилась комплексно по клиническим, физиологическим и патоморфологическим показателям (табл.4). Общая продолжительность наблюдения составляла 14 дней.

Таблица 4

Показатели оценки общетоксического действия наноразмерных частиц на организм лабораторных животных

Клинические показатели

Определение DL50 мг/ кг; гибель животных и признаки интоксикации;

наличие и характер судорог

Физиологические показатели

Общее состояние животных

(внешний вид, поведение, двига- тельная активность, состояние шерстного покрова, потребление корма и воды, частота моче- испускания, динамика массы тела)

Патоморфологические показатели

Макроскопические исследования:

коэффициенты массы внутренних органов (печень, почки, селезенка, надпочечники)

Экспериментальное изучение поведенческих реакций проводили комплексно с интегральной оценкой поведенческих параметров, основанной на применении методов «открытого поля» и «норкового рефлекса». Оценка двигательной активности проводилась по количеству пересечённых при движении секторов и числу вертикальных стоек животного; ориентировочно- исследовательская деятельность по количеству заглядываний в норки- отверстия и заходы в домик; эмоциональная реактивность по числу фекальных шариков за время опыта. При нейротоксическом действии наиболее чувствительным является «вертикальный» компонент двигательной активности и параметры исследовательского поведения, горизонтальная активность отличается стабильностью. Поэтому рекомендуется наряду с интегральной оценкой активности животных учитывать соотношение активности, которое позволяет установить определение закономерности и выраженность токсического действия химических соединений [25].

Статистическая обработка данных проводилась с помощью программ Excel, Probit Analys, Statistica. Достоверность различий определялась по непараметрическому критерию Манна-Уитни, t – тесту Стьюдента [1,45,49,53]. Различия между группами признавались достоверными при уровне значимости P

<< | >>
Источник: Гуськова Оксана Альбертовна. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ НАНОМАТЕРИАЛОВ. ДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА МЕДИЦИНСКИХ НАУК. Москва - 2014.

Еще по теме Исследование общетоксического действия in vivo на лабораторных животных:

  1. Исследование раздражающего действия in vivo на кожу и слизистые оболочки лабораторных животных
  2. 3.1 Оценка общетоксического действия в опытах in vivo
  3. Оценка общетоксического действия в опытах in vivo
  4. Оценка общетоксического действия в опытах in vivo
  5. Глава 3. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО И РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НЧ СЕРЕБРА IN VIVO и IN VITRO
  6. Результаты сравнительной оценки общетоксического и раздражающего действия в опытах in vivo и in vitro
  7. ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО И РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НАНОРАЗМЕРНЫХ ЧАСТИЦ ЦИНКА В ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VIVO И IN VITRO
  8. Результаты сравнительной оценки общетоксического и раздражающего действия в опытах in vivo и in vitro
  9. Результаты сравнительной оценки общетоксического и раздражающего действия в опытах in vivo и in vitro
  10. ГЛАВА 5. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО И РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НАНОРАЗМЕРНЫХ ЧАСТИЦ ТИТАНА ДИОКСИДА В ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VIVO И IN VITRO
  11. Исследование общетоксического действия на альтернативной модели фотолюминесцентных бактерий «Эколюм»
  12. Исследование общетоксического действия in vitro на альтернативной модели сперма крупного рогатого скота