<<
>>

ВИРУС НАТУРАЛЬНОЙ ОСПЫ

Морфология. Вирион имеет кирпичеобразную форму с закругленными углами размером 300—450 • 170—260 нм. Это самый крупный вирус животных. Он имеет сложное

строение и состоит из сердцевины (нуклеоида), имеющей форму двояковогнутой линзы (фигура восьмерки), по обе стороны от которой находятся овальные образова­ния, называемые боковыми телами.

Сердцевина содержит ДНК, упакованную в белковый футляр в виде цилиндри­ческих или нитевидных фигур, и окружена внутренней и наружной мембранами. Сердцевина и белковые тела окружены внешней оболочкой с характерными шарооб­разными выступами.

Химический состав и физико-химические свойства. Большинство данных, относящихся к вирусу оспы, по­лучены при изучении родственного ему вируса оспо- вакцины. Вирионы содержат в своем составе двунитчатую ДНК, составляющую 5—7,5% от массы вириона, более 30 структурных белков, включая ферменты, липиды (4% от сухой массы), углеводы (3% от сухой массы). Липиды входят в состав наружной оболочки вирионов. Хотя липиды вирионов оспы являются компонентами клетки-хозяина, однако соотношение их в вирионах иное, нежели в клетках. Масса вириона 5,26 ∙ IO-15г.

Геном вируса оспы представляет линейную молекулу двунитчатой ДНК с молекулярной массой более 130 • 10®, значительно большей, чем у других вирусов животных. ДНК содержит оккло 240 000 пар нуклеотидов при общей ее длине 82 мкм. На обоих концах молекулы имеются ковалентные сшивки, поэтому нити ДНК обладают необычной прочностью и не разделяются полностью при щелочной денатурации. Благодаря большой молеку­лярной массе ДНК обладает обширной генетической информацией.

Белки, антигены. В составе вирионов содержится более 30 структурных белков с молекулярной массой от 11 ∙ IO3 до 150 ∙ IO3(по другим данным от 8 ∙ IO3до 200 ∙ IO3). Из них 17 обнаружены в сердцевине, в том числе два белка, составляющих 50% от суммарного белка сердце­вины.

Пять белков локализовано на поверхности вириона, 8 — в более глубоких слоях наружной оболочки. Поверх­ностные белки являются гликопротеидами, и, по-види­мому, с ними связан иммунитет к оспе. Вирусы оспы и осповакцины весьма сходны в антигенном отношении и отличаются друг от друга не более чем одним анти­геном. Все антигены можно разделить на структурные, растворимые и гемагглютинин. К структурным белкам- антигенам относится N P-антиген, общий для всего се­мейства; этот антиген связан с белком нуклеокапсида.

Среди растворимых антигенов есть термолабильный (Л) и термостабильный (С). Гемагглютинин является липо­протеидным комплексом, содержащим три гликопротеида. Он представляет собой свернутую в клубок трубчатую структуру, легко отделяющуюся от вириона. Гемагглюти­нин вызывает агглютинацию эритроцитов цыплят в широ­ком диапазоне температур (от 4 до 37° С) и pH (от 4,6 до 10,0).

В вирионах оспы (осповакцины) выявлено 12—13 фер­ментов. Среди них находится ДНК-зависимая РНК-по- лимераза и другие ферменты, связанные с транскрип­цией ДНК, модификацией иРНК, киназы и протеазы.

Устойчивость к физическим и химическим факторам. Вирус оспы является сравнительно устойчивым. Он устой­чив к эфиру, большинству дезинфекционных средств, к высыханию и может храниться в высохших экссудатах в течение многих месяцев при комнатной температуре, а в жидкости везикул на холоду — в течение нескольких лет. В 50% растворе глицерина вирус сохраняет инфек­ционную активность при 40 C в течение нескольких лет.

Репродукция. Вирус проникает в цитоплазму клетки посредством эндоцитоза. «Раздевание» вирионов и осво­бождение генома происходит в две стадии. В первой стадии протеолитические ферменты клетки разрушают наружную оболочку вирионов, происходит частичная транскрипция генома с образованием сверхранних иРНК и последующим синтезом раздевающего белка, затем наступает вторая стадия раздевания, в результате кото­рой разрушаются оболочки нуклеоида и вирусная ДНК начинает полностью функционировать.

Затем начинается синтез ранних иРНК, которые считываются с других участков ДНК, ставших теперь доступными. Дочерние молекулы ДНК являются матрицами для синтеза позд­них иРНК, которые транслируются с образованием около 80 структурных и неструктурных вирусных белков. Все процессы происходят в цитоплазме в так называемых фабриках, которые представляют своеобразные клеточные структуры, модифицированные вирусом. Репродукция вирусов оспы заканчивается через 6—7 ч. Зрелые вирионы через аппарат Гольджи доставляются к клеточной поверхности и выходят из клеток путем экзоцитоза. Включения в цитоплазме (в околоядерной области) зараженных клеток являются либо «фабриками» в стадии их функционирования, либо их остатками вместе с не­использованными продуктами вирусиндуцированного син­

теза. Эти включения называются «тельца Гварниери», они имеют диагностическое значение при оспе.

Патогенез и клиника. Вирус проникает в клетки слизистой оболочки верхних дыхательных путей и после размножения по лимфатической системе переносится в регионарные лимфатические узлы. В них происходит дальнейшее размножение вируса и наступает первичная вирусемия, которая приводит к инвазии ретикулоэндо­телиальной системы. Начинается интенсивное размноже­ние вируса, приводящее ко вторичной вирусемии. После этого вирус накапливается в эпидермисе и вызывает поражения кожи. C появлением сыпи больной становится заразен. Основным источником заражения является отделяемое носоглотки. Заболевание развивается после инкубационного периода продолжительностью 8—18 дней и начинается внезапно лихорадкой, головной болью, бо­лями в мышцах, прострацией и появлением характерной сыпи. Сыпь проходит стадии макулы, папулы, везикулы, пустулы и завершается образованием рубца — все это длится 3 нед. C появлением сыпи температура снижается и вновь повышается, когда образуются пустулы. Тяжесть течения варьирует. Известны две формы оспы — натураль­ная (variola major) с летальностью 20—40% и аластрим (variola minor) с летальностью 1—2%.

Иммунитет. Перенесенная инфекция приводит к раз­витию стойкого, почти всегда пожизненного иммунитета. Вакцинация также сопровождается формированием стойкого иммунитета. Приобретение прочного гумораль­ного иммунитета в результате вакцинации позволило ликвидировать оспу во всем мире.

Эпидемиология. Натуральная оспа передается воздуш­но-капельным путем, заражение наступает при общении с больным, который при кашле и разговоре разбрызгивает в воздух отделяемое оспенных поражений слизистых оболочек. Заражение может также произойти и через предметы обихода и одежду больного, потому что вирус обладает стойкостью во внешней среде. Больной заразен в течение всего периода болезни, вплоть до отпадания корок, но наиболее всего — в течение первых 8—10 дней.

Эпидемии возникают во многих странах, но главным ее очагом являлась Юго-Восточная Азия (Индия, Пакис­тан, Бангладеш). В СССР оспа была ликвидирована в 1936 г., однако и после этого она неоднократно зано­силась из соседних стран (Иран, Афганистан). Последний раз в СССР оспа была занесена из Индии в 1960 г.

В 1958 г. по предложению советской делегации Все­мирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) приняла резолюцию о глобальном искоренении оспы. Для осуще­ствления этой задачи потребовалось 18 лет. На всех этапах выполнения этой программы Советский Союз оказывал большую помощь, предоставив 1,5 млрд, доз оспенной вакцины, а также специалистов.

В 1975 г. был зарегистрирован последний случай variola major в Бангладеш, а в 1976 г.— последний слу­чай variola minor в Сомали.

Лабораторная диагностика. Несмотря на то что оспа в настоящее время ликвидирована во всем мире, каждый вирусолог должен уметь обследовать подозрительного на оспу больного, отличить по клиническим признакам от сходных заболеваний, вызываемых другими вирусами: герпеса и близкородственными вирусами осповакцины, коровьей оспы и оспы обезьян, а также от других за­болеваний, сопровождающихся сыпью.

Материалом для исследования служат содержимое везикул, пустул, чешуйки и корочки, взятые C кожи и слизистых оболочек, отделяемое носоглотки и кровь. В летальных случаях исследуют кусочки пораженной кожи, легкого, селезенки, кровь. Готовят мазки-отпе­чатки из содержимого пустул или соскоба из папул и отделяемого носоглотки и складывают отпечатками внутрь. Хранение и пересылку материала осуществляют по правилам, предусмотренным для особо опасных ин­фекционных материалов.

Быстрая диагностика. Для быстрой и ранней диагнос­тики в острой стадии заболевания используют вирусо- скопию, методы ИФ и выявления вирусного антигена в инфекционном материале. В мазках, приготовленных из содержимого везикул жидкости, взятой из высыпаний на коже и слизистых, под электронным микроскопом обнаруживаются вирусные частицы характерной формы в высокой концентрации. На стадии образования пустул вирусоскопия реже применяется в связи с уменьшением количества вируса.

В отпечатках из лопнувших, надрезанных пузырьков и соскобленных папул обнаруживаются клетки, содержа­щие тельца Гварниери, которые располагаются в цито­плазме вблизи ядра по 1—2 и более в одной клетке, имеют различную величину и форму.

Специфический антиген в мазках-отпечатках из кож­ных высыпаний и отделяемого носоглоток выявляют с

помощью непрямого метода иммунофлюоресценции. В окрашенных препаратах специфический антиген обна­руживается в клетках и межклеточном пространстве в виде яркосветящихся округлых мелких зерен и конгло­мератов различной величины и формы.

Антиген из жидкости везикул, пустул, экстракта корок и в сыворотке больных оспой может быть выявлен C помощью гипериммунных сывороток животных в РСК, РОПГА, ИФА и в других специфических реакциях.

Выделение вируса. Вирус выделяют из инфек­ционного материала путем заражения куриных эмбрионов и культур клеток. Оба метода обладают одинаковой чувствительностью. Куриные эмбрионы 11—12-дневного возраста заражают на хорион-аллантоисную оболочку (XAO) и инкубируют при температуре 35o C 3—5 сут. При вскрытии на XAO обнаруживаются мелкие белые плотные очаги поражения с резко очерченными грани­цами, иногда окруженные прозрачной зоной. Серологи­ческую идентификацию вируса проводят в PH на кури­ных эмбрионах, PCK или РТГАтс куриными эритроцитами (однако свежевыделенные штаммы вируса оспы не обладают или обладают слабой гемагглютинирующей активностью).

Из культур клеток наиболее чувствительны к вирусу оспы культуры перевиваемых клеток человека — Hela, Hep-1, Hep-2, J-96, FL и др. Вирус вызывает ЦПД, про­являющееся в появлении резко контурированных очагов клеточной пролиферации. Они обнаруживаются через 24—30 ч после заражения. В дальнейшем появляются генерализованные некротические изменения ткани, РГадс появляется позже цитопатических изменений. Для иден­тификации вируса используется РТГадс с гипериммунными сыворотками животных.

Идентификацию вируса в культуре ткани можно проводить с помощью ИФ. Специфический антиген выявляется через 9—12 ч после заражения в цитоплазме вблизи ядра. При отрицательном результате выделения вируса делают дополнительно 2—3 слепых пассажа в культуре клеток, используя экстракты зараженных куль­тур после их трехкратного замораживания и оттаива­ния.

Выделение вируса в куриных эмбрионах и культурах клеток осуществляется в 90—100% случаев оспы различ­ной тяжести. Наиболее легко вирус выделяется из содер­жимого везикул, хуже — из содержимого пустул и корок.

Из крови больных вирус может быть выделен в течение первой недели заболевания.

Серологическая диагностика. Прирост ан­тител в парных сыворотках больных определяется в РТГА, РСК, PH в куриных эмбрионах и на культурах клеток. Все три реакции имеют одинаковую чувствитель­ность. Сыворотки больных прогревают при температуре 560 C в течение 30 мин. Антигемагглютинирующие ан­титела появляются уже к 5—6-му дню заболевания и нарастают в течение последующих 1—2 нед. Антигеном в РТГА является суспензия XAO куриных эмбрионов, зараженных вирусом осповакцины, или стандартный гемагглютинирующий диагностикум. В PCK и PH в ка­честве антигена используются экстракты XAO или куль­туры клеток, подвергнутые трехкратному замораживанию и оттаиванию.

Лечение и профилактика. Для лечения, помимо па­тогенетической и симптоматической терапии, применяли химиотерапевтический препарат из группы р-тиосемикар- базонов — метисазон. Его же применяли для профилак­тики заболеваний среди лиц, соприкасавшихся с больным оспой.

Однако основным средством, с помощью которого была достигнута победа над оспой, была оспенная вак­цина (осповакцина), предложенная еще в 1796 г. англий­ским врачом Э. Дженнером. Естественно, что в настоящее время препараты оспенной вакцины значительно усо­вершенствованы, как равным образом и методы прививки. Для массовых прививок применяются безыгольные инъек- торы, а для индивидуальных — бифуркационная (раз­двоенная) игла, позволяющая точно дозировать вакцину прививаемому. Победа над оспой была достигнута также в результате правильной организации выявления и подавления ее очагов. C ликвидацией оспы во всем мире прививки против нее прекращены.

<< | >>
Источник: Букринская А.Г.. Вирусология.— M.: Медицина, 1986 г. 336 с.. 1986

Еще по теме ВИРУС НАТУРАЛЬНОЙ ОСПЫ:

  1. ВИРУС ОСПЫ ОБЕЗЬЯН И СХОДНЫЕ ВИРУСЫ
  2. Глава 1. СЕМЕЙСТВО ВИРУСОВ ОСПЫ (Poxviridae)
  3. ВИРУС ВЕТРЯНОЙ оспы И ОПОЯСЫВАЮЩЕГО ГЕРПЕСА
  4. Вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая (Род Varicellovirus)
  5. Натуральная оспа
  6. Натуральная оспа (Variola veraj
  7. Лекция 28 ДНК-геномные вирусы. Онкогенные вирусы.
  8. Лекция 23 Вирусы — возбудители ОРВИ: ортомиксовирусы, парамиксовирусы, коронавирусы, вирус краснухи.
  9. Общие сведения о вирусе папилломы человека. Классификация папилломавирусной инфекции. Пути передачи вируса.
  10. РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНЫЙ ВИРУС (РС-ВИРУС)
  11. Глава 2. ПРИРОДА И ПРОИСХОЖДЕНИЕ ВИРУСОВ ПРИРОДА ВИРУСОВ