<<
>>

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

БВВЭ является одним из опаснейших заболеваний. По данным ВОЗ летальность при БВВЭ составляет от 25% до 90%. Вспышка БВВЭ 2013-2016 годов, которая возникла в Западной Африке, была самой значительной с момента идентификации вируса в 1976 году, и расширилась до масштабов эпидемии.

Начиная с Гвинеи, БВВЭ распространилась и на соседние страны: Сьерра-Леоне и Либерию. Болезнь охватила не только сельское население, но и городское. Так же были зафиксированы завозные случаи БВВЭ за пределами Африканского континента.

Эффективной мерой в борьбе с эпидемиями является своевременная вакцинопрофилактика, но не смотря на то, что разработка вакцин против лихорадки Эбола началась еще в 1980 году, к моменту начала эпидемии в 2014 году в мире не было ни одного зарегистрированного вакцинного препарата [Промежуточное руководство Всемирной организации здравоохранения. INTERIM GUIDANCE Potential Ebola therapies and vaccines 5 November 2014.].

Так как вакцины на основе инактивированного вируса крайне опасны для применения, а ДНК-вакцины крайне сложны в применении из за многократности введения, что не допустимо в условиях эпидемии, то одним из наиболее перспективных направлений в разработке вакцин против БВВЭ является получение, вакцин основанных на рекомбинантных вирусных векторах, экспрессирующих гликопротеин GP вируса Эбола. В ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи» Минздрава России в 2014, согласно рекомендациям ВОЗ, была разработана комбинированная векторная вакцина против БВВЭ для введения в режиме прайм-буст: с промежутком в 3 недели вводятся компоненты А и Б. Вакцина основана на оригинальной комбинации двух рекомбинантных вирусных векторов:

Компонент А - рекомбинантный вирус везикулярного стоматита (rVSV), несущий и экспрессирующий гликопротеин GP вируса Эбола;

Компонент Б - рекомбинантноый аденовирус человека 5 серотипа (rAd5), экспрессирующих гликопротеин GP вируса Эбола.

Проведенные доклинические исследования позволили получить разрешение на проведение клинических исследований разработанной вакцины.

Основными критериями оценки вакцинных препаратов являются безопасность, реактогенность и иммуногенность. В настоящей работе были проведены клинические исследования безопасности, реактогенности и иммуногенности новой вакцины против БВВЭ - ГамЭвак-Комби.

Результаты проведенных клинических исследований показали, что у добровольцев на первом этапе исследования препарата (когда исследовали безопасность отдельных компонентов вакцины) вакцинальные реакции были слабой и средней степени выраженности. Наиболее характерными нежелательными явлениями были: миалгия, головная боль, озноб, слабость, болезненность в месте введения препарата, что характерно для вакцин, основанных на рекомбинантных вирусных векторах. Все описанные НЯ были легкой степени тяжести и не потребовали дополнительных медикаментозных вмешательств для их купирования. Не выявлено негативного влияния Компонента А и Компонента Б вакцины на показатели АД, ЧСС, показатели клинических и биохимических анализов крови и мочи. Анализ данных ЭКГ, характеризующих кардиотоксичность, в частности нарушение проводимости, отсутствовали. В ходе исследования не выявлено токсического действия вакцины на печень и почки. Так же при анализе полученных результатов не было выявлено влияния компонентов вакцины на показатели гуморального и клеточного иммунитета: в ходе наблюдения существенных изменений, выходящих за пределы нормальных значений, количества иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA, IgE и ЦИК, а так же увеличения активности фагоцитов зафиксировано не было.

В ходе второго этапа исследования (когда вакцину вводили согласно инструкции по применению в режиме прайм-буст: Компонент А и Компонент Б с интервалом в 21 день) потребовалось дополнительное назначение жаропонижающего препарата парацетамола в дозировке 500 мг шести

добровольцам (7,14%): у 4 добровольцев 1 -ой когорты (половинная доза вакцины) после применения компонента Б; во второй когорте: у 1 добровольца - после введения компонента А, и у 1 добровольца - после введения компонента Б.

У добровольцев второго этапа (введение полной дозы вакцины согласно инструкции по применению) не выявлено негативного влияния вакцины на жизненно-важные показатели (АД, ЧСС). Анализ данных ЭКГ-исследования не выявил токсического действия исследуемого препарата на миокард и его проводящую систему. В ходе исследования не выявлено токсического действия вакцины на функции печени и почек.

При оценке иммунотоксичности не установлено отрицательного действия вакцины ГамЭвак-Комби на гуморальный и клеточный иммунный ответ. В процессе исследования не было выявлено существенных изменений, выходящих за пределы нормальных значений, в содержании основных классов иммуноглобулинов (IgA, IgE, IgM и IgG), циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови, а также в активности фагоцитов. У нескольких добровольцев было отмечено незначительное повышение уровня IgE и ЦИК, однако эти изменения были непродолжительными.

Таким образом, проведенные клинические исследования вакцины ГамЭвак- Комби позволяют заключить, что вакцина имеет хороший профиль безопасности при использовании у здоровых добровольцев.

Важнейшим критерием оценки вакцины является ее иммуногенность. Иммуногенность вакцины оценивали по нескольким параметрам гуморального и клеточного иммунного ответа.

Индукцию гуморального иммунитета оценивали по продукции гликопротеин-специфических IgG и вирус-нейтрализующих антител в сыворотке крови добровольцев после иммунизации. Так, анализ GP-специфических IgG в сыворотке крови здоровых добровольцев показал, что иммунизация вакциной ГамЭвак-Комби приводит к формированию специфического гуморального иммунного ответа. Сероконверсия составила 100%. Титры GP-специфических IgG в сыворотке крови добровольцев, иммунизированных половинной и полной дозой

вакцины, составили 1:2500 и 1: 3300, соответственно, на 42 день исследования. Также было проведено исследование вирус-нейтрализующей активности сывороток крови иммунизированных добровольцев. Было показано, что в ответ на введение половинной дозы комбинированной векторной вакцины у 83,3% добровольцев на 28 день обнаружены нейтрализующие антитела в титре 1:20 и выше, и у 80% на 42 день.

Общее количество добровольцев, у которых были обнаружены вирус-нейтрализующие антитела составило 90%. На введение полной дозы вирус нейтрализующими антителами отреагировало 79,3% добровольцев на 28 день в титре 1:20 и выше, и 70% добровольцев на 42 день. Общее количество добровольцев, ответивших вирус-нейтрализующими антителами после иммунизации вакциной ГамЭвак-Комби, составило 93,1%.

Индукцию клеточного иммунитета у вакцинированных добровольцев исследовали по антиген-специфической лимфопролиферации МКПК и по антиген-специфической индукции экспрессии ИФН-гамма МКПК.

Исследование клеточного иммунного ответа показало, что иммунизация здоровых добровольцев вакциной ГамЭвак-Комби вызывает формирование антиген-специфических Т-лимфоцитов у здоровых добровольцев. Так, на 28 день после иммунизации половинная доза вакцины индуцировала выработку Т- клеточного иммунитета у 83% (25 добровольцев из 30) по данным

лимфопролиферативного ответа CD4+ клеток, и 73,3% (22 добровольцев из 30) по данным пролиферации CD8+ клеток. При использовании одной полной дозы вакцины на 28 день после иммунизации процент здоровых добровольцев, в пробах которых был зарегистрирован пролиферативный ответ CD4+ Т- лимфоцитов после добавления антигена GP вируса Эбола, составил 82,7% (24 добровольцев из 29), а CD8+ Т-лимфоцитов - 58,6% (17 добровольцев из 29). Кроме того, эксперименты по оценке общего Т-клеточного иммунитета (специфическая экспрессия ИФН-гамма общей популяцией Т лимфоцитов в ответ на стимуляцию антигеном GP вируса Эбола) показали, что половинная доза вакцины ГамЭвак-Комби вызывала продукцию ИФН-гамма у 96,7% (29

добровольцев из 30), тогда как иммунизация полной дозой вызывала продукцию ИФН-гамма у 100% (29 добровольцев из 29).

Одним из ограничений использования препаратов на основе рекомбинантного аденовируса человека 5 серотипа является широкое распространение предсуществующего иммунного ответа к вакцинному вектору в популяции людей, так как он может негативно влиять на показатели специфического иммунного ответа при вакцинации [Zhu et al., 2015., Ledgerwood et al., 2010]. Эта проблема была решена введением вакцины в режиме прайм-буст: сначала для праймирования был введен компонент на основе rVSV, содержащий гликопротеин GP вируса Эбола, затем через 21 день для бустирования использовали компонент на основе rAd5, экспрессирующий гликопротеин GP вируса Эбола, что позволило нейтрализовать отрицательный эффект ранее существовавшего иммунитета к Ad5. Корреляционный анализ, где проводили сравнение титра ВНА к rAd5 с показателями напряженности гуморального и клеточного иммунного ответа, показал, что наличие предсуществующего иммунного ответа к rAd5 не влияет на напряженность клеточного иммунного ответа при введении вакцины ГамЭвак-Комби в обеих исследуемых дозах, а также на напряженность гуморального иммунного ответа при введении вакцины в полной дозе [Dolzhikova et al., 2017].

Таким образом, анализируя данные, полученные в ходе клинического исследования, можно заключить, что вакцина ГамЭвак-Комби индуцирует формирование специфического гуморального и клеточного иммунного ответа у 100% добровольцев вне зависимости от наличия предсуществующего иммунного ответа к аденовирусному вектору. Данные также показывают, что вакцина на основе rVSV-GP и rAd5-GP не вызывает серьезных побочных эффектов и имеет хороший профиль безопасности у здоровых добровольцев.

По результатам проведенных клинических исследований в конце 2015 года вакцина ГамЭвак-Комби была зарегистрирована для медицинского применения (регистрационный номер ЛП-003390). Вакцина ГамЭвак-Комби является первой в мире лицензированной вакциной против БВВЭ.

В настоящее время проводятся пострегистрационные исследования вакцины ГамЭвак-Комби в Республике Гвинее с участием 2000 добровольцев [Клинические исследования. ClinicalTrials.gov NCT03072030].

<< | >>
Источник: Токарская Елизавета Александровна. Оценка иммуногенности и безопасности генно-инженерной векторной вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола, у здоровых добровольцев. ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Москва - 2019. 2019

Еще по теме Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ:

  1. Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  2. ГЛАВА V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
  3. ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  4. ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  5. ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
  6. Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
  7. Глава 4 Обсуждение результатов исследования
  8. ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
  9. Глава 5. Обсуждение полученных результатов
  10. ГЛАВА IV ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ