<<
>>

Методы серийных разведений

Позволяют количественно оценить чувствительность выделенно­го микроба к антибактериальным средствам и определить МИК пре­парата. Методы серийных разведений основаны на прямом определе­нии величины МИК.

Для определения величины МИК заданные концентрации анти­биотиков вносят в питательную среду, которую затем засевают куль­турой исследуемого микроорганизма. После инкубации оценивают наличие или отсутствие видимого роста.

В зависимости от характера используемой питательной среды различают метод серийных разведений в бульоне, метод серийных разведений в агаре.

В зависимости от объема используемой жидкой питательной среды выделяют также методы серийных макро - и микроразведений.

Разновидностью метода серийных разведений является также ме­тод, основанный на использовании только двух концентраций анти­биотиков или даже одной концентрации, соответствующих порого­вым (то есть концентрациям, отделяющим чувствительные микроор­ганизмы от промежуточных и промежуточные от резистентных). Ме­тод обеспечивает получение качественных результатов, позволяющих отнести исследуемый микроорганизм к определенной категории чув­ствительности, и часто используется в коммерческих тест-системах.

Метод серийного разведения антибиотика в питательной среде (бульоне).

Первоначально готовят основной раствор, содержащий опреде­ленную концентрацию антибиотиков в специальном растворителе. Из него готовят ряд убывающих разведений антибиотиков в пробирках с бульоном (чаще двухкратные) и добавляют испытуемую культуру (обычно 105-106бактериальных клеток). Контролем служит пробирка с бульоном и культурой без антибиотиков. Сроки инкубации зависят от вида микроорганизма (чаще сутки). Определяют МИК, которая со­ответствует концентрации препарата в последней пробирке с видимой задержкой роста (прозрачная питательная среда). Для определения минимальной бактерицидной концентрации (МБК) из нескольких по­следних пробирок с задержкой роста делают посев петлей на сектора чашки Петри.

За МБК, которая, как правило, на несколько разведений меньше МИК, принимают концентрацию препарата в последней про­бирке, посев из которой не дал роста.

Метод серийных разведений в плотной питательной среде.

Этот метод более чувствителен и точен, чем метод бумажных дисков. Каждый антибиотик испытывают, как правило, в трех кон­центрациях (исходя из уровней чувствительности микроорганизмов), которые добавляют к расплавленному и охлажденному агару. Агар с антибиотиками разливают в чашки Петри. Контролем служит чашка с агаром без антибиотиков. Посев производят петлей или лучше штам­пом-репликатором, который позволяет одновременно определить чувствительность к трем концентрациям антибиотиков 25-50 культур (в зависимости от числа лунок в штампе). Учет роста в термостате осуществляют спустя сутки. Культура считается чувствительной, если на месте посева нет роста ни одной колонии.

Оценка результатов:

- чувствительные культуры - их рост подавлен всеми тремя концентрациями (можно применять антибиотики в сред­ней терапевтической дозе);

- среднечувствительные (можно применять антибиотики только в увеличенной дозе) - рост подавляют вторая и третья концентрация антибиотиков;

- умеренно-устойчивые подавляет только третья наиболее высокая концентрация (антибиотики применяют только местно);

- устойчивые (антибиотики применять нельзя по тестам in vitro) - растут на всех трех концентрациях.

7.7.4.

<< | >>
Источник: Новиков Д.К., Генералов И.И., Данющенкова Н.М. и др.. Медицинская микробиология. Витебск, 2010. 2010

Еще по теме Методы серийных разведений:

  1. Глава 1. Обзор технологии построения карт возбуждения предсердий и методов моделирования динамики возбуждения предсердий (выбор метода моделирования)
  2. Ускоренные методы
  3. Методы исследования ЭЗДП
  4. 2.3. Методы исследования
  5. Диффузионные методы
  6. Методы исследования
  7. Верифицирующие методы диагностики ИБС
  8. Методы исследования
  9. 2.2.3. Статистические методы
  10. 2.2. Методы исследования.
  11. Методы исследования
  12. Методы исследования
  13. МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ
  14. Лабораторные методы исследования
  15. Немедикаментозные методы лечения
  16. Другие методы