<<
>>

Лекция 5 Противомикробные мероприятия.

Микробиологические основы химиотерапии бактериальных инфекций.

В медицинской практике часто требуется контролировать нежелательный микробный рост, ограничивать его появление и скорость, частично или полностью уничтожать микроорганизмы во внешней среде или в живых тканях.

Для этого используют физические, химические, биологические или комплексные воздействия на микроорганизмы. Эффект от таких воздействий может быть микробицидным (гибель микроорганизмов) или микробостатическим (прекращение их роста и размножения).

В зависимости от характера и целей антимикробного воздействия различают:

• дезинфекцию — уничтожение на абиотических объектах патогенных микробов (обеззараживание объектов);

• стерилизацию — полное уничтожение на абиотических объектах жизнеспособных микроорганизмов и их спор (обеспложивание объектов);

• антисептику — уничтожение или ограничение роста микроорганизмов в живых тканях;

• деконтаминацию — удаление микробного загрязнения объектов до безопасного уровня;

• консервацию — предотвращение роста и размножения микроорганизмов на объектах.

Дезинфекция — это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение на абиотических объектах патогенных микробов. После дезинфекции могут сохраняться споры микроорганизмов, вегетативные формы погибают.

В медицине применяют физические и химические методы дезинфекции. Физические методы:

• механические (вытряхивание, проветривание, влажная уборка, стирка с моющим средством);

• действие высокой температуры (проглаживание утюгом, кипячение, пастеризация);

• УФО (облучение бактерицидными лампами);

• ультразвук.

Химические методы. При дезинфекции химическим методом применяют следующие дезинфицирующие вещества:

• хлорсодержащие препараты (хлорная известь, хлорамин Б, гипохлорит кальция, гипохлорит натрия)

• окислители (перекись водорода, перманганат калия);

• фенолы (карболовая кислота, лизол);

• йод и йодофоры (иод + ПАВ);

• соли тяжелых металлов (сулема, диоцид, мертиолят);

• поверхностно-активные вещества — ПАВ (сульфанол);

• четвертичные аммониевые соединения (мирамистин, роккал, бензалкония хлорид и др.);

• спирты (70 % этанол);

• формальдегид (формалин);

• красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий);

• кислоты (салициловая, борная и др.);

• альдегиды (глютаровый).

Требования, предъявляемые к дезинфектантам:

• эффективность;

• доступность;

• безопасность.

В целях недопущения выработки устойчивости циркулирующих в ЛПУ микроорганизмов к дезинфицирующим средствам рекомендуется периодически (не реже чем ежеквартально) чередовать препараты, в составе которых имеются различные действующие вещества.

Если позволяют условия, предпочтение следует отдавать физическому методу дезинфекции, поскольку он более прост, надежен, экологически чист и безопасен для персонала.

Стерилизация — полное обеспложивание объектов, при котором уничтожаются все формы микроорганизмов (вегетативные и споры).

Стерильность — отсутствие вегетативных и споровых форм микроорганизмов на абиотических объектах, достигаемое после действия физических, химических факторов или их сочетания.

Для стерилизации применяют физические и химические методы.

Физические методы:

• высокая температура;

• ионизирующее излучение («холодная стерилизация»);

• фильтрование через коллодийные фильтры.

Химические методы стерилизации применяют для изделий, которые нельзя стерилизовать физическими методами (из-за термолабильности, конструкции). Проводится стерилизация растворами химических средств и газовая стерилизация.

Стерилизация растворами химических средств. Используют различные режимы стерилизации, например 6%-й раствор перекиси водорода, экспозиция 6 ч (изделия из полимерных материалов, стекла, коррозионностойких металлов); 4,8%-й раствор первомура, экспозиция 15 мин (лигатурный шовный материал).

Газовая стерилизация. Этот метод применяется для обработки оптики, сложной техники. Используют:

• окись этилена;

• смесь ОБ (окись этилена с бромистым метилом);

• пары раствора формальдегида в этиловом спирте.

Методы тепловой стерилизации

Метод Аппаратура Режим Стерилизируемый материал
Прокаливание Спиртовка, газовая горелка До красного каления Бактериологические петли, мелкие металлические инструменты
Горячим воздухом Воздушный стерилизатор 180°С, 60 мин (160°С,150 мин) Стеклянная посуда, пипетки, пробирки, металлические инструменты
Паром под давлением Паровой стерилизатор (автоклав) 120°С, 45 мин

132°С, 20 мин

Простые питательные среды, изделия из стекла, металла, резины, халаты, белье, перчатки, перевязочный материал.

Факторы, определяющие эффективность стерилизации

Метод стерилизации Действующие факторы
Паровой Температура, давление, экспозиция, степень насыщенности пара
Воздушный Температура, экспозиция
Газовый Этилен-оксидный Концентрация газа, температура, экспозиция, давление, относительная влажность
Пароформалиновый Концентрация газа, температура, экспозиция, давление, степень насыщенности пара
Химический Концентрация активно действующего вещества в растворе, экспозиция

Асептика — комплекс мероприятий, направленных на предотвращение попадания микроорганизмов в рану, лекарственные препараты, питательные среды и другие объекты.

Она включает:

• стерилизацию инструментов, приборов, материалов;

• специальную (антисептическую) обработку рук перед асептичной работой;

• соблюдение определенных правил и приемов работы (стерильный халат, маска, перчатки, исключение разговоров и т.п.);

• осуществление специальных санитарно-противоэпидемических и гигиенических мероприятий (правильная вентиляция, влажная уборка с применением дезинфицирующих средств, использование бактерицидных облучателей, боксированных помещений).

Антисептика (от анти + греч. septikos — гнилостный, вызывающий гниение) — это комплекс мероприятий, направленных на подавления роста и размножения потенциально опасных для здоровья микроорганизмов на интактных или поврежденных коже и слизистых оболочках, ранах, полостях тела.

Различают антисептику:

1) механическую (например, при обработке раны удаление из нее инфицированных и нежизнеспособных тканей);

2) физическую (наложение гигроскопических повязок, применение гипертонических растворов, способствующих оттоку раневого отделяемого в повязку, сухого тепла, УФО, лазера и т.д.);

3) химическую (применяют химические вещества, обладающие бактерицидными или бактериостатическим действием при минимальном органотропном действии, например, мирамистин или хлоргексидин; в лекарственные препараты вносят борную кислоту, мертиолят и др.);

4) биологическую (применение антибиотиков, бактериофагов,

протеолитических ферментов, иммуноглобулинов, средств,

стимулирующих защитные силы организма).

Химиотерапия — лечение бактериальных, вирусных и паразитарных заболеваний с помощью химиотерапевтических препаратов, которые избирательно подавляют развитие и размножение соответствующих инфекционных агентов в организме человека.

Более часто в клинике используется термин аншбиотикотерапия.

Антибиотики — химиотерапевтические вещества природного (микробного, грибкового, животного, растительного и т.д.), полусинтетического или синтетического происхождения, которые в малых концентрациях вызывают торможение размножения и/или гибель

чувствительных к ним микроорганизмов во внутренней среде макроорганизма.

Для антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов характерна специфичность и избирательность действия на микроорганизмы. Антисептики и дезинфектанты обладают неспецифическим (общетоксическим) действием на широкий круг микроорганизмов. Эти различия в антимикробном действии обусловлены химическим строением веществ и отражаются в величине их действующих доз: у химиотерапевтических препаратов тот же эффект наблюдается при концентрациях в 100-1000 раз меньших, чем у других антимикробных средств.

Классификация антибиотиков

Антибиотики классифицируют и характеризуют по происхождению, химической структуре, механизму действия, спектру действия, частоте развития лекарственной устойчивости.

По происхождению различают антибиотики природные или естественные (получены из бактерий, грибов, животных, растений и т.п.), полусинтетические и синтетические.

Классификация антибиотиков по механизму действия

Механизм действия Группы препаратов
I. Ингибиторы синтеза клеточной стенки β-лактамы (пенициллины, цефалоспорины, монобактамы, карбапенемы) гликопептиды
II. Ингибиторы функций и структуры цитоплазматической мембраны полимиксины бацитрацин
III. Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот рифампицин хинолоны нитрофураны
IV. Ингибиторы синтеза белка (нарушают сборку белка на рибосомах) аминогликозиды тетрациклины линкозамиды хлорамфеникол макролиды
V. Модификаторы энергетического метаболизма (антиметаболиты) сульфаниламиды триметоприм изониазид

Классификация антибиотиков по эффекту воздействия действия

Бактерицидные препараты Бактериостатические препараты
• в-лактамы;

• аминогликозиды;

• хинолоны, включая фторхинолоны;

• гликопептиды;

• полимиксины;

• полиены;

• бацитрацины;

• триметоприм

• макролиды

• тетрациклины;

• линкозамиды;

• хлорамфеникол

• сульфаниламиды;

• нитрофураны

Устойчивость микроорганизмов к антибактериальным препаратам

Существуют два типа лекарственной устойчивости бактерий: естественная, или природная, и приобретенная.

Естественная лекарственная устойчивость является видовым признаком. Она присуща всем представителям данного вида и не зависит от первичного контакта (контактов) с данным антибиотиком, в ее основе нет никаких специфических механизмов.

Приобретенная лекарственная устойчивость возникает у отдельных представителей данного вида бактерий в результате изменения их генома. Возможны два варианта генетических изменений. Один из них связан с мутациями в генах бактериальной хромосомы, вследствие которых продукт атакуемого гена перестает быть мишенью для данного антибиотика. В другом случае бактерии становятся устойчивыми к антибиотику или сразу к нескольким антибиотикам благодаря приобретению дополнительных генов в составе R-плазмиды.

Никаких других механизмов приобретенной лекарственной устойчивости не существует. Однако, приобретая устойчивость к антибиотику, а тем более сразу к нескольким антибиотикам, такие бактерии получают наивыгоднейшие преимущества: благодаря селективному давлению антибиотиков происходит вытеснение чувствительных к ним штаммов данного вида, а антибиотикоустойчивые варианты выживают и начинают играть главную роль в эпидемиологии данного заболевания.

Известны пять основных биохимических механизмов устойчивости:

1. Недостаточная проницаемость клеточной стенки микроорганизма.

2. Изменение или элиминация мишени действия антибиотика.

3. Развитие микроорганизмом альтернативных ферментативных путей, которые не блокируются под воздействием антибиотика.

4. Разрушение или инактивация препарата.

5. Активное выведение антибиотика из микробной клетки.

Ограничение развития устойчивости к противобактериальным препаратам, главные правила:

• применять антибиотики только при наличии показаний;

• применять антибиотики в терапевтических дозах — субтерапевтические дозы антибиотиков способствуют селекции устойчивых клонов микроорганизмов;

• постоянно контролировать уровень резистентности микроорганизмов у пациентов стационаров и амбулаторных больных;

• ограничивать применение антибиотиков, уменьшить использование антибиотиков в клинической практике, животноводстве и т.п.;

• не использовать новые препараты до тех пор, пока проявляют эффективность уже используемые средства.

Определение чувствительности к антибиотикам

• Микроорганизм считают чувствительным, если у него нет механизмов резистентности к данному антимикробному средству и при лечении стандартными дозами инфекции, вызванной данным микроорганизмом, отмечается хорошая терапевтическая эффективность.

• Устойчивым к антимикробному средству считают микроорганизм,

если он имеет механизмы резистентности к данному препарату и при лечении инфекций, вызванных этим микроорганизмом, нет

клинического эффекта даже при использовании максимальных терапевтических доз этого препарата.

• Микроорганизм относят к умеренно устойчивым, если по своей чувствительности он занимает промежуточное значение между чувствительными и устойчивыми штаммами и при лечении инфекций, вызванных данным возбудителем, хорошая клиническая эффективность наблюдается только при использовании высоких терапевтических доз препарата.

Методы определения чувствительности к антибиотикам

Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.

Минимальная подавляющая концентрация - наименьшая концентрация антибиотика (в мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий.

Диффузионные методы

При определении чувствительности диско-диффузионным методом на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате при температуре 35 - 37°С в течение ночи учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах. Е-тесты. Определение чувствительности микроорганизма проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е- теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).

Достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории.

Методы разведения

Методы разведения основаны на использовании двойных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (например, от 128, 64 мкг/мл и т.д. до 0,5, 0,25 и 0,125 мкг/мл). Антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или агар. Затем бактериальную суспензию, помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке. После инкубации в течение ночи при температуре 35 - 37°С проводят учет полученных результатов.

Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) или на поверхности агара свидетельствует о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма уменьшается. Первую наименьшую концентрацию антибиотика (из серии последовательных разведений), при которой визуально не определяется бактериальный рост, принято считать МПК. Измеряется МПК в мг/л или мкг/мл.

В последние годы в практике широко применяется полимеразная цепная реакция для выявления у микробов специфических генов, ответственных за формирование лекарственной устойчивости (геноиндикация антибиотикоустойчивых культур).

Контроль качества исследований антибиотикорезистентности основан на параллельной оценке клинических штаммов и контрольных штаммов микроорганизмов.

<< | >>
Источник: Курс лекций по микробиологии, вирусологии, иммунологии для студентов 2-3 курсов факультета по подготовке специалистов для зарубежных стран. / Тапальский Д.В., Ильинская Т.Н., Шевцова Л.В., Лагун Л.В. — Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет»,2012. — 317 с.. 2012

Еще по теме Лекция 5 Противомикробные мероприятия.:

  1. Микробиологические основы дезинфекции, асептики, антисептики. Противомикробные мероприятия
  2. Контроль выполнения запланированных мероприятий, оценка их качества и эффективности, доклад о ходе проведения мероприятий и результатах руководителю стационара
  3. ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА МАТОЧНОГО МОЛОЧКА
  4. ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ свойства меда
  5. ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА ПЧЕЛИНОГО ЯДА
  6. ЕСТЕСТВО ПРОТИВОМИКРОБНЫХ ВЕЩЕСТВ МЕДА
  7. ПРОФИЛАКТИКТИЧЕСКИЕ МЕРОПРИЯТИЯ
  8. Глава 15 ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ И ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКИЕ МЕРОПРИЯТИЯ
  9. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ
  10. ДЕЗИНФЕКЦИОННЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ КРОВЯНЫХ ИНФЕКЦИЯХ
  11. Общепрофилактические мероприятия
  12. 15.1 Общая структура профилактических и противоэпидемических мероприятий
  13. ЦЕЛЬ ОЖИДАЕМЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ЗАДАЧИ МЕРОПРИЯТИЯ
  14. ГЛАВА V КАРАНТИННЫЕ И ОГРАНИЧИТЕЛЬНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ
  15. Характеристика мероприятий блока организации и управления и их внедрение
  16. ДЕЗИНФЕКЦИОННЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ