Иерсинии
13.1.6.1. Иерсинии псевдотуберкулеза
Возбудитель псевдотуберкулеза - Yersinia pseudotuberculosis. Впервые выявлен французскими учеными Малассе и Виньялем в 1883 г. в материале от умершего ребенка с диагнозом туберкулезного менингита.
Позже Эберт выделил возбудителя в чистой культуре, изучил свойства и отметил общие с туберкулезом патоморфологические изменения в пораженных органах.Морфология. Короткая полиморфная овоидная палочка с закругленными концами хорошо воспринимает анилиновые красители, гра- мотрицательна. Лучше прокрашивается по полюсам - биполярно. В мазках из бульонных культур располагается парами или короткими цепочками. В мазках из агаровой культуры могут быть ветвистые, нитевидные формы. Подвижна при температуре 18-200С, при 370С движение прекращается.
Культуральные свойства. Растет на простых и даже голодных средах, факультативный анаэроб. Разработаны и применяются жидкие специальные и плотные питательные среды, например плотная среда Серова (МПА, глюкоза, мочевина, молибденовокислый аммоний, желчь, генцианвиолет, индикатор конгорот - среда темно-вишневого цвета) и жидкая среда Серова (1% пептонная вода, глюкоза, феноловый красный). Оптимальная температура роста 22-280С, могут расти при 40С. Колонии на плотных средах мелкие, полупрозрачные с нежным фестончатым краем, полиморфны по цвету и величине, могут образовывать золотисто-коричневый пигмент. В S-форме колонии напоминают росинки. На плотных средах кроме S-колоний могут появляться R-формы и SR - переходные. При росте на плотной среде дают неприятный запах.
Биохимические свойства. Активны, расщепляют до кислоты многие углеводы: глюкозу, рамнозу, мальтозу, маннит, глицерин, декстрин; не расщепляют лактозу, сахарозу. Обладают уреазной активностью, восстанавливают нитраты в нитриты.
Факторы патогенности.
При разрушении высвобождают эндотоксин с гемолитическими свойствами, который вызывает гемолиз эритроцитов кролика, морской свинки, барана, лошади и не лизирует эритроциты человека. Выражены аллергизирующие свойства.Антигенная структура. Выделено три антигена: Н-жгутиковый, два соматических О- антигена: S и R. R - общий для всех иерсиний, по S-антигену различают 10 сероваров. От людей чаще выделяют 1, 3 и 4 серовары. Иерсинии 1 и 3 сероваров - токсигенны.
Устойчивость во внешней среде. Чувствительны к нагреванию, высушиванию, дезсредствам; устойчивы к холоду, переносят температуры до -250С. Вне организма в молоке сохраняются до 16 дней, могут размножаться; в хлебе - 24 дня; в масле - 145 дней; в воде - до 244 дней. Долго сохраняются на свежих овощах, фруктах, в квашениях и могут там размножаться.
Характеристика заболевания
Источники инфекции - грызуны, зайцы, лисы, крупный рогатый скот, свиньи и другие животные. Грызуны выделяют иерсинии во внешнюю среду с калом, мочой, загрязняя ее. Это способствует заражению домашних животных, создается дополнительный резервуар инфекции. Люди инфицируются от грызунов и других животных алиментарным путем через продукты, чаще овощные, не подлежащие термической обработке - квашения, салаты. Случаев заражения людей непосредственно от грызунов чрезвычайно редки. Роль человека как источника инфекции не доказана. Чаще болеют дети в возрасте от 3-х лет и старше в любой сезон года, но заболеваемость выше в осенне-зимнее время.
Патогенез. Вместе с пищей возбудитель поступает в слизистую оболочку илеоцекального угла, область слепой кишки, аппендикулярный отросток. Инкубационный период длится в среднем 8-10 дней Патогенность Ypseudotuberculosisсвязана с продукцией токсинов и действием ЛПС клеточной стенки. По лимфатическим путям попадают в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь. Начало острое, развивается интоксикация, вызванная эндотоксином. Патологические процессы могут развиться в печени, селезенке, легких, суставах и т.д.
Клинические формы псевдотуберкулеза самые разнообразные. Всем формам сопутствует аллергия в виде крапивницы. Псевдотуберкулез - токсикоинфекция с циклическим течением, поражением желудочнокишечного тракта, лимфаденитом, поражением различных органов. Летальность 0,3%.Лабораторная диагностика
Материал для исследования берется различный, но при всех клинических формах обязательно исследуются фекалии.
Бактериологический метод. Первичный посев исследуемого материала производят в консервант - фосфатный буфер или жидкую среду накопления, Серова. В глицериновом консерванте иерсинии гибнут. Посевы выдерживают в холодильнике до 30 суток, делая каждые 3-4 дня высевы на плотные среды, например Эндо, Серова. Выращивание производят при комнатной температуре. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар или на среду Эндо в сектора. Выделенную культуру идентифицируют по комплексу морфологических, культуральных, биохимических, серологических свойств, фаго- лизабельности. Обязательно дифференцируют от возбудителя чумы (Y. pestis) и от возбудителя кишечного иерсиниоза (см. табл. 10).
Биобактериологический метод. Для накопления иерсиний материалом заражают белых мышей или морских свинок с последующим выделением и идентификацией культуры.
Серологический метод. Применяется на 7-14 дни болезни. Ставится реакция агглютинации (титр 1:200) или в более ранние сроки - РПГА (титр 1:100) с набором эритроцитарных диагностикумов, несущих антигены разных типов иерсиний. Реакция ставится в динамике заболевания, регистрируется нарастание титра антител.
Дополнительно можно ставить экспресс-методы - РПГА для обнаружения возбудителя в материале или МИФ с этой же целью.
Таблица 10.
Дифференциация возбудителей псевдотуберкулеза от возбудителей чумы
Иммунитет после перенесенного заболевания нестойкий, возможны повторные случаи.
Профилактика неспецифическая, предупреждение загрязнения грызунами овощей и других продуктов.
Лечение - назначение антибиотиков с учетом чувствительности возбудителя.
13.1.6.2. Y.enter ocolitica
Иерсиниоз, вызываемый Yenterocolitica,представляет собой инфекционное заболевание из группы антропозоонозов с поражением желудочно-кишечного тракта, явлениями интоксикации и бактериемии, сходное с псевдотуберкулезом. В настоящее время рост заболеваемости кишечным иерсиниозом отмечается повсеместно.
Морфология. Сходная морфология с возбудителями чумы и псевдотуберкулеза. В отличие от Y.pseudotuberculosisподвижность у Yenterocoliticaсохраняется и при температуре 370С.
Культуральные свойства такие же как и у Ypseudotuberculosis.
Биохимические свойства хорошо выражены. Ферментируют до кислоты глюкозу, мальтозу, маннит, сахарозу, арабинозу, мочевину; не расщепляют лактозу, рамнозу, дульцит, декстрин, обладают каталазной активностью. По расщеплению трегалозы, салицина, эскулина и других углеводов описано 5 биоваров. Yenterocoliticaтак же, как и возбудители псевдотуберкулеза, не обладают плазмокоагулирующей и фибринолитической и протеолитической активностью. Вызывают гемолиз эритроцитов человека и животных.
Антигенная структура: у Yenterocoliticaвыявлены О- и Н- антигены. По О-антигену разделены на 30 сероваров. Кроме того, обнару
жены антигены, родственные с другими иерсиниями, сальмонеллами, эшерихиями, протеем, холерным вибрионом, бруцеллами.
Токсинообразование. Возбудители кишечного иерсинеоза высвобождают при разрушении эндотоксин, связанный с ЛПС клеточной стенки и действующий энтеротропно. Они способны к внутриклеточному паразитированию.
Факторами патогенности являются адгезины к клеткам эпителия тонкого кишечника, инвазины, помогающие взаимодействию с эпителиальными клетками кишечника, термостабильный энтеротоксин, который стимулирует синтез гианилатциклазы.
Характеристика заболевания
Источник инфекции. В природе иерсинии выделяются от зайцев, среди которых эта инфекция очень распространена, от грызунов, гусей, диких уток, бобров, енотов, пресноводных рыб; от домашних животных - коров, овец, свиней, лошадей, собак, кошек. Есть наблюдения, что источником заболевания может быть и человек. Известны внутрисемейные вспышки кишечного иерсиниоза, вспышки в детских коллективах, больницах, когда прямой контакт с животными исключен.
Способы заражения: алиментарный, контактно-бытовой, особенно если источник инфекции человек. Восприимчивы к заболеванию люди от 4 месяцев до 80 лет. Заболевание регистрируется в течение всего года, но чаще осенью. Заражение происходит при употреблении овощных, мясных и других продуктов, особенно без термической обработки, контаминированных иерсиниями. Немаловажное значение имеет способность иерсиний сохраняться и размножаться при низких температурах.
Патогенез. Попав через рот и преодолев зищитный барьер желудка иерсинии, обладая адгезинами и пилями, внедряются в слизистую оболочку и лимфоидные образования терминального отдела тонкого кишечника, размножаются в пейеровых бляшках и мигрируют в брыжеечные лимфатические узлы. Из лимфы микроорганизмы проникают в кровь. Генерализация процесса сопровождается токси- немией и паренхиматозной диффузией, поражением суставов, что связано со способностью компонентов клеточной стенки взаимодействовать с молекулами II класса HLA, образуется суперантиген, который вызывает поликлональную активацию Т-клеток.
Клиническая картина разнообразная, в подавляющем большинстве случаев отмечается диарея, гепатолиенальный синдром. Преобладание той или иной симптоматики связывают с возрастом больного. Решающее значение придается лабораторным исследованиям. Постановка микробиологического диагноза проводится точно так же, как при псевдотуберкулезе. Материал для исследования берется различ
ный, но обязательно исследованию подлежат фекалии. Выделенную культуру дифференцируют от возбудителя псевдотуберкулеза по следующим свойствам (см. табл. 11).
Профилактика - неспецифическая, предупреждение инфицирования из перечисленных выше источников.
Лечение - антибиотики тетрациклинового ряда, ампициллин. К пенициллинам, цефалоспоринам, олеандомицину, новобиоцину Yenterocoliticaрезистентна. Можно для лечения использовать аминогликозиды (гентамицин), сульфаниламиды (бисептол), но предварительно следует проверять степень чувствительности у выделенной культуры к этим препаратам.
Таблица 11.
Дифференциация Yenterocoliticaот возбудителей псевдотуберкулеза
ПРИЗНАКИ | Wpseiidotiiberciilosis | Y.enterocolitica |
Ферментация углеводов: | ||
- сахарозы | - | + |
- рамнозы | + | - |
Г емолиз эритроцитов человека | - | + |
Подвижность при 37oC | - | + |
Лизабельность поливалентным псевдотуберкулезным фагом | + | |
Агглютинация псевдотуберкулезными сыворотками | + |
13.1.6.3 Возбудители чумы
Таксономия: семейство Enterobacteriaceae,род Yersinia,вид Y.pestis;подвиды: pestis; altaica; caucasicaи др. Первый подвид является основным.
Чума является острым природно-очаговым, трансмиссивным, ан- тропозоонозным заболеванием, относящимся к особо опасным конвенционным инфекциям. Она характеризуется лихорадкой, тяжелой интоксикацией, серозно-геморрагическим воспалением лимфатических узлов, поражением внутренних органов, септицемией, высокой летальностью, быстрым распространением на целые материки.
Во время третьей пандемии чумы (1894) Китазато и Иерсен выделили возбудителя в чистой культуре. В 1944 г. по предложению ван
Логхема род, в который входил возбудитель чумы, был назван родом Yersinia. В него включено 11 видов. Наибольшую роль в патологии играет Y.pestis- возбудитель чумы.
Свойства
Морфологические. Возбудители чумы отличаются полиморфизмом, могут иметь шаровидную, кольцевидную, но чаще овоидную форму с биполярной окраской, грамотрицательны. Не имеют жгутиков, спор, образуют капсулу в организме и на свежих средах (слегка кислых) при 370С, имеют пили - органы адгезии.
Культуральные свойства. Аэробы, хорошо растут на простых питательных средах. Оптимальная температура роста 27-280С, рН среды 6,9-7,1. На М11Б дают нежную пленку, от которой вниз отходят нити, («сталактитовый рост»). На МПА рост нежных мелких колоний с приподнятыми краями, напоминают кружевной или батистовый платочек. Могут диссоциировать на вирулентные R- и авирулентные S- формы. Длительность роста 18-24 ч, для ускорения роста в среду добавляют стимуляторы: кровь, сульфат натрия или лизат культуры сарцины.
Биохимические свойства. Разлагают до кислоты глюкозу, арабинозу, маннит, мальтозу, не разжижают желатин, не разлагают мочевину, ферментируют белки до сероводорода, не имеют оксидазы, обладают каталазной активностью.
Антигенные свойства. Иерсинии чумы имеют сложный антигенный состав. О-АГ (эндотоксин) представлен липополисахариднобелковым комплексом. К-АГ капсульный, гликопротеиновой природы, обладает сильными иммуногенными свойствами, препятствует фагоцитозу. V-АГ-белок и W-АГ-липопротеин обладают антифагоци- тарными свойствами. Ферменты инвазии и агрессии, выделяемые возбудителем чумы, тоже обладают антигенными свойствами (фибринолизин, плазмокоагулаза и др.)
Резистентность возбудителя. Возбудители чумы гибнут при температуре 50-700С через 30 минут, при 1000С - через 1 минуту, при температуре 220С сохраняют жизнедеятельность в течение 4 месяцев. Губительное действие на возбудителя оказывают растворы сулемы, лизола, 3% карболовая кислота и антибиотики.
Факторы патогенности. Вирулентные штаммы возбудителя чумы выделяют целый ряд факторов, обеспечивающих устойчивость возбудителя в организме человека и способность вызвать инфекционный процесс. Наибольшее значение имеют токсины: ЛПС (эндотоксин) и экзотоксин. Они оказывают токсическое и аллергенное действие на организм, блокируют перенос электронов в митохондриях сердца, печени и других органов. Бактериоцины (пестицины) обеспечивают антагонистические свойства возбудителя. Антигены V-Wугнетают фа
гоцитоз. Аденилатциклаза подавляет «дыхательный взрыв», блокирует киллерное действие макрофагов, аминопептидазы разрушают регуляторные пептиды. Капсула угнетает активность макрофагов. Ферменты инвазии и агрессии (фибринолизин, плазмокоагулаза, нейраминидаза) способствуют паразитированию возбудителя. Пили являются органами адгезии и способствуют внедрению возбудителя чумы в макрофаги.
Факторы патогенности контролируются генами плазмид трёх видов: I - pVP (pst-ген кодирует синтез пестицинов, pim определяют иммунитет к пестицину и pla обеспечивает фибринолитическую и плазмокоагулирующую активность), II - pVT - плазмида токсигенно- сти, III- pVV - плазмида вирулентности. Плазмида инвазивности (72 кв) кодирует остров патогенности, который называется IOP-вирулон. Он кодирует инвазивные белки ISC 3 типа секреций, обеспечивающих микробное проникновение в эпителиоциты кишечника и фагоциты подавляют фагоцитоз за счет блокады цитоскелета и блокады выработки цитокинов.
Характеристика заболевания
Природные очаги чумы. Различают природные первичные («дикая чума») и синантропные очаги чумы («городская», «портовая», «корабельная» и «крысиная»). Природные очаги сложились в древние времена. Циркуляция возбудителя в них происходит между дикими животными и кровососущими членистоногими (блохи, клещи). Человек в этих очагах инфицируется через укусы переносчиков возбудителя или при контакте с кровью инфицированных животных. Известно около 300 видов и подвидов грызунов - носителей возбудителя чумы. Особую роль среди них играют суслики, крысы, морские свинки.
Синантропные очаги чумы являются вторичными. В них источниками и хранителями инфекции являются домашние мыши и крысы, у которых заболевание чаще протекает в хронической форме или в виде бессимптомного носительства. Наиболее активными переносчиками чумы являются крысиные блохи в очагах первого и второго вида.
Патогенез. Входные ворота - кожа и слизистые оболочки.
Пути передачи: трансмиссивный через укусы инфицированных блох; контактный при снятии шкурок у инфицированных промысловых грызунов и разделке мяса зараженных верблюдов; алиментарный - при употреблении в пищу продуктов, обсеменённых возбудителями чумы, и аэрогенный - при контакте с больными лёгочной формой чумы.
Возбудитель размножается в кишечнике блохи, паразитирующей на грызунах и других природных хозяевах микроба, у которых вызывает хроническую инфекцию. Благодаря действию бактериальной ко
агулазы в пищеводе блохи формируется пробка из чумных бактерий (чумный блок), который блоха срыгивает в место укуса.
При попадании высоковирулентного штамма в популяцию животных - природных хозяев возбудителя чумы, среди животных наблюдается массовая гибель (эпизоотия), что вынуждает блох искать новые источники питания и нападать на человека.
При температуре тела блохи (280С) чумной микроб не образует F-АГ, V-W-АГ. При попадании в организм человека при температуре 370С начинает продуцировать эти факторы, в результате вирулентность возрастает. В месте внедрения Y.pestisпоглощается макрофагами, где частично погибает, а выжившие бактерии попадают в регионарные лимфоузлы - развивается серозно-геморрагическое воспаление, образуется первичный бубон (спаянные между собой лимфатические узлы), который характеризуется резкой болезненностью. Гнилостная микрофлора вызывает нагноение бубона.
Сначала развивается бактериемия, а затем септицемия. Большое значение в патогенезе отводится незавершённому фагоцитозу, лимфогенному и гематогенному распространению возбудителя, развитию множественных полиаденитов и возникновению серозногеморрагических очагов в лимфатических узлах и внутренних органах, угнетению иммунных реакций. Этому способствуют и другие факторы патогенности возбудителя.
Выделяют 7 форм чумы: кожная форма сопровождается появлением некротической язвы у входных ворот; бубонная - резко увеличивается регионарный лимфоузел, развивается геморрагическое воспаление; первично-септическая форма - бурное начало, озноб, лихорадка, сильнейшая головная боль, возбуждение, бред, токсический шок, кома, чаще заканчивается смертью; вторично-септическая форма - осложнение других форм, течение очень тяжёлое, прижизненная диагностика затруднена; первично-легочная форма - наиболее тяжёлая и эпидемиологически очень опасная. Характеризуется тяжелой пневмонией с геморрагическими изменениями в легких и кровянистой жидкой мокротой с большим количеством возбудителя, присоединяются изменения со стороны сердечно-сосудистой системы, отёк лёгких, смерть; вторично-легочная форма - осложнение других форм; чума у вакцинированных больных протекает легче с удлинённым инкубационным периодом, но если не начинают активную терапию - заболевание может протекать так же тяжело, как у невакцини- рованных.
Иммунитет стойкий, клеточный, велика роль Т-лимфоцитов, макрофагов и завершенного фагоцитоза.
Лабораторная диагностика
Исследуют отделяемое из язв, пунктаты лимфоузлов, ликвор, кровь, мокроту.
Бактериоскопический метод. Готовят мазки, окрашивают по Граму с целью выявления грамотрицательных биполярных овоидных микроорганизмов.
Бактериологический метод. Материал сеют на простые питательные среды. Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим,тинкториальным, культуральным, биохимическим, антигенным, биологическим свойствам и признакам патогенности.
Ускоренный бактериологический метод. Делают посев на среды со специфическим бактериофагом. Оценивают результаты по наличию негативных фаговых колоний.
Ускоренный метод для определения антигена возбудителя чумы в материале от больного. С этой целью можно использовать ИФА, РИФ, РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом.
Молекулярно-генетический метод - постановка ПЦР.
Биологический метод. Заражают морских свинок с целью выделения возбудителя и его идентификации.
Профилактика. Поскольку чума является особо опасной инфекцией, то профилактика должна проводиться в нескольких направлениях.
Активная специфическая профилактика проводится живой аттенуированной вакциной из штамма EV, реже используют химическую вакцину. Вакцинацию проводят лицам из группы риска (врачи инфекционных больниц, работники санитарно-эпидемиологической службы.) В очагах чумы вакцинируют пастухов, охотников, геологов, работников противочумных учреждений. Иммунитет сохраняется 6-8 месяцев. Неспецифическая профилактика предусматривает профилактическую работу по выявлению очагов чумы; дезинфекцию, дератизацию и дезинсекцию в очагах; раннюю диагностику заболевания, изоляцию и лечение больных; объявление карантина; обсервацию контактных; работу в специальных костюмах с материалом от больных или подозреваемых на заболевание чумой; охрану границ от заноса чумы; выполнение международных конвенций по профилактике чумы.
Лечение. Антибиотики с учётом чувствительности возбудителя к ним, чаще препараты тетрациклинового ряда (доксициклин), аминогликозиды, левомицетин. Параллельно вводят противочумную сыворотку или гамма-глобулин, для дезинтоксикации - полиглюкин, гемодез.
13.2.
Еще по теме Иерсинии:
- Лекция 15 Энтеробактерии — характеристика семейства. Эшерихии. Шигеллы. Сальмонеллы. Иерсинии.
- Кишечный иерсиниоз
- ИЕРСИНИОЗ И ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗ
- ИЕРСИНИОЗЫ
- СОДЕРЖАНИЕ
- Профилактика пищевого пути передачи возбудителей
- Действие физических и химических факторов окружающей среды на микроорганизмы
- Псевдотуберкулез, иерсиниоз
- Этиологическая структура и проблемы лабораторной диагностики
- Основы гинекологического исследования и акушерства. Практические манипуляции,
- СОДЕРЖАНИЕ
- ОСМОТР ШЕЙКИ МАТКИ ПРИ ПОМОЩИ ЗЕРКАЛ
- БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
- ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ