Методы исследования.

Была проведена комплексная оценка состояния больных ИЭ с использованием клинических, лабораторных и инструментальных методов обследования. Проводился осмотр пациентов, подробный сбор анамнеза.

Специальная программа исследования:

— Исследование гемокультуры с определением чувствительности к антибиотикам проводилось при помощи автоматизированных бактериологических анализаторов BD BACTEC FX. Использовали два вида питательных сред: для культивирования аэробов (BD BACTEC Plus Aerobic/F) и анаэробов (BD BACTEC Plus Anaerobic/F). Забор крови производился во флаконы со средой путем пункции периферической вены у всех больных, с подозрением на ИЭ, до начала антибактериальной терапии, а при невозможности - перед очередным введением антибактериального препарата. Взятие проб крови осуществлялось 2-3-кратно с интервалом 30 минут.

— Эхокардиографическое исследование проводилось под руководством доцента кафедры терапии РМАПО, профессора Рыбаковой М. К. на ультразвуковом приборе Technos mpx (ESAOTE, Италия) на кафедре ультразвуковой диагностики. Всем больным выполнялась трансторакальная

ЭХО-КГ, при наличии показаний - чрезпищеводная ЭХО-КГ. В динамике оценивались размеры камер сердца, ФВ ЛЖ, толщина МЖП и 3 СЛЖ, степень клапанной регургитации, легочной гипертензии, размеры и локализация вегетаций, наличие фистул, абсцессов клапанных структур, отрыва хорд.

— Взятие проб крови для специальной программы исследования производилось в пробирки Vacuette (Greiner Bio-One, Австрия) путем пункции периферической вены, либо из центрального венозного катетера. Полученные образцы крови центрифугировались при комнатной температуре в течение 20 минут при 3000об/мин, после чего плазма и осадок форменных элементов крови раздельно подвергались замораживанию в морозильной камере при температуре -18°С для последующего исследования. Определение изучаемых показателей проводилось в динамике: при поступлении и через 3 недели.

— Определение концентрации СРБ в сыворотке крови методом иммунотурбидиметрии «CRP hs FS» («Diasys Diagnostic Systems») на автоматическом биохимическом анализаторе KoneLab 20 (Финляндия). Нормальные значения СРБ составляли 0-5мг/л.

— Измерение концентрации ФНОа в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-системы альфа- ФНО-ИФА-БЕСТ (ЗАО «ВЕКТОР-БЕСТ», Россия). Нормальные значения ФНОа составляли 0-6 пг/мл.

— Исследование концентрации ИЛ-13 и ИЛ-6 в плазме крови иммуноферментным методом при помощи наборов для количественного определения человеческого ИЛ-13 и ИЛ-6 в биологических жидкостях человека и культуральных средах ИНТЕРЛЕЙКИН-1бета-ИФА-БЕСТ и ИНТЕРЛЕЙКИН-6-ИФА-БЕСТ (ЗАО «ВЕКТОР-БЕСТ», Россия). Нормальные значения ИЛ-13 составляли от 0 до 11 пг/мл, ИЛ-6 - от 0 до 10 пг/мл.

— Определение концентрации hsTn I в сыворотке крови методом

хемилюминесцентного анализа на микрочастицах (CMIA) на автоматическом анализаторе ARCHITECT i2000SR (Abbott Laboratories, США). В качестве верхней границы нормы hsTnI использовалось значение 99-й процентили для данного метода - 12 пг/мл.

— Измерение концентрации NTproBNP в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов NTproBNP-ИФА-БЕСТ (ЗАО «ВЕКТОР-БЕСТ», Россия). Нормальные значения NT roBNP находились в диапазоне от 0 до 200 пг/мл.

— Изучение концентрации VEGF в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа при помощи набора реагентов VEGF-ИФА- БЕСТ ( АО ВЕКТОР-БЕСТ», Россия).

Исследование данных показателей проводилось под руководством профессора кафедры клинической лабораторной диагностики РМАПО, д.м.н. профессора Ройтмана А. П.

Статистический анализ полученных данных проводился с использованием пакета программ SPS S v 16.0 (SPSS Inc., США). Тип распределения количественных признаков определяли визуально (при построении гистограммы) и/или с применением критерия Колмогорова- Смирнова. При нормальном распределении количественных признаков их описание проводили с помощью среднего арифметического значения (М) ± стандартная ошибка среднего (m). При непараметрическом - с помощью медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (25-й; 75-й

процентили). Качественные показатели представлены в долях (процентах), по ординальной (бальной) шкале и/или факту наличия признака. Гипотезу о равенстве средних двух несвязанных выборок проверяли с помощью двухвыборочного t-критерия Стьюдента с поправкой при статистически значимом тесте Levene на гомогенность дисперсий в случаях нормального распределения, при непараметрическом распределении данных - с помощью U-критерия Манна-Уитни. Для сравнения средних величин двух связанных

выборок использовали t-критерий для парных выборок, а при отличном от нормального распределении данных - критерий Уилкоксона. Сравнение частотных признаков в независимых выборках выполнено с помощью критерия Пирсона χ². Различие парных частотных признаков (значения до- после) определяли с помощью критерия МакНемара. Проведен корреляционный анализ данных с определением коэффициента корреляции (r). В качестве критического уровня статистической значимости различий был принят уровень при р