Методы исследования

Все исследования проводились в стандартных условиях, по единым методикам.

Методы лабораторных исследований

Всем пациентам проводили комплексное лабораторное обследование, включавшее: общеклинический анализ крови и мочи; биохимическое исследование с определением концентрации глюкозы сыворотки венозной крови, МК, показателей липидного обмена (общего холестерина (ХС), ХС ЛПНП, ХС липопротеинов очень низкой плотности (ХС ЛПОНП), ХС липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), ТГ, b-липопротеидов).

В качестве лабораторного маркера ЭД, отражающего выраженность повреждения сосудистой стенки, определяли количество циркулирующих в крови эндотелиальных клеток (ЦЭК) по методу J. Hladovec. Пробу венозной крови объемом 5 мл с добавлением 3,8% цитрата натрия в соотношении 1:9 подвергали 10-минутному центрифугированию при 200 g для получения богатой тромбоцитами плазмы. Далее 1 мл полученной плазмы смешивали с 0,2 мл натриевой соли аденозиндифосфата с последующим повторным центрифугированием в прежнем режиме для удаления агрегата тромбоцитов. Осаждение эндотелиальных клеток из выделенного супернатанта достигали путем 10-15 минутного центрифугирования при 200 g. Образец полученного

преципитата суспензировали в 0,1 мл 0,9% раствора хлорида натрия и перемещали в камеру Горяева. Количество клеток подсчитывали в двух сетках камеры методом фазово-контрастной микроскопии. Расчет числа десквамированных эндотелиоцтов производили как n?10⁴/л [12].

Суточное мониторирование артериального давления

Суточное мониторирование артериального давления (СМАД) осуществлялось в условиях стационара на программно-аппаратном комплексе BpLab. Интервал измерений в дневной (с 7:00 до 23:00) период составлял 30 минут, в ночной (с 23:00 до 7:00) период – 60 минут.

Из анализируемых показателей СМАД учитывались:

средние значения систолического АД (САД) и диастолического АД (ДАД) за день и ночь, мм рт. ст.;

индекс времени гипертензии или процент измерений, превышающих нормальный уровень АД за день и ночь (за пороговые значения принимали: САД днем – 140 мм рт. ст., САД ночью – 120 мм рт. ст., ДАД днем – 90 мм рт. ст., ДАД ночью – 80 мм рт. ст.), %;

вариабельность САД и ДАД или стандартное отклонение АД от средней величины за день и ночь, мм рт. ст.;

среднее пульсовое АД, мм рт. ст.;

величина утреннего подъема САД и ДАД, мм рт. ст.; скорость утреннего подъема САД и ДАД, мм рт. ст./час;

суточный индекс САД и ДАД или степень ночного снижения АД, %. Суточный индекс САД и ДАД вычисляли по формуле:

Суточный индекс, % = (АД, день – АД, ночь) / АД, день * 100%, где

АД, день – среднее САД или ДАД за день; АД, ночь – среднее САД или ДАД за ночь.

На основании данных о степени ночного снижения АД (СНСАД) определяли принадлежность пациента к соответствующей группе согласно следующей классификации (отдельно по критериям САД и ДАД):

1. Нормальное (Dipper) – 10% < СНСАД < 20%

2. Недостаточное (Non-dipper) – 0 < СНСАД < 10%

3. Повышенное (Over-dipper) – 20% < СНСАД

4. Устойчивое повышение ночного АД (Night-peaker) – СНСАД < 0

Эхокардиографическое исследование

Количественная оценка размеров камер сердца, массы и функции ЛЖ проводились методом двухмерной эхокардиографии (ЭХО КГ) в сочетании со сканированием в М-режиме на аппарате «Vivid Е General Electric» (США).

По общепринятым методикам рассчитывали следующие параметры центральной гемодинамики: фракцию выброса ЛЖ (ФВ ЛЖ, %), ударный объём (УО ЛЖ, мл) и фракцию укорочения (ФУ ЛЖ, %).

Гипертрофию ЛЖ диагностировали при величине ИММ ЛЖ, превышающей 115 г/м² [31].

По характеру трансмитрального потока крови судили о нарушении диастолической функции (ДФ) ЛЖ. При этом оценивались следующие параметры: Е, м/с (максимальная скорость раннего наполнения ЛЖ), А, м/с (максимальная скорость позднего наполнения ЛЖ), их соотношение и время изоволюмического расслабления ЛЖ. Исследуемые показатели измеряли не менее

чем в трех последовательных сердечных циклах, включая в окончательные расчеты средние данные.

Высокочастотная ультразвуковая допплерография

Исследование системы микроциркуляции проводили неинвазивным способом с помощью высокочастотной ультразвуковой допплерографии (прибор

«Минимакс-Допплер-К»). Отличительной особенностью данного метода от других ультразвуковых диагностических систем является то, что работа осуществляется в постоянноволновом режиме (в датчике прибора располагаются два пьезокристалла: один из которых постоянно излучает волны, другой непрерывно воспринимает отраженные импульсы). Это дает возможность оценить такие параметры как, направление тока крови в макро- и микрососудах, линейную и объемную скорости движения крови, а также распределение частиц крови с разными скоростями по сечению исследуемого сосуда. Кроме того, конструкцией прибора предусмотрено устройство слухового контроля, что помогает в правильной постановке датчика, а также получить четкую спектральную картину по громкости звучания и определить тип исследуемого сосуда [10].

Для оценки тканевой перфузии использовали датчик с частотой излучения

25 МГц, сканирующий микрокровоток на глубину до 5 мм, получая, таким образом, интегральный показатель с определенного среза ткани (наиболее часто используемые области – зона ногтевого валика, тыльная поверхность кисти).

Исследование выполнялось при поступлении больного в стационар, а также до и после каждой процедуры ЭГК. Особое внимание уделялось стандартизации метода: температура в помещении около 20-25 Сº, в течение 15 минут до начала диагностики пациент находился в спокойном состоянии, исключалась физическая

активность. За два часа до исследования испытуемый не должен был принимать пищу, курить. За сутки отменялся прием всех вазоактивных препаратов.