2.1. Материалы и методы исследований
Работа выполнена на кафедре акушерства, хирургии и незаразных болезней животных ФГБОУ ВПО «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева» в период с 2011 по 2014 гг.
Материалом для исследования служили инкубационные яйца и выведенные из них цыплята кросса «Хайсекс коричневый» с 1 до 30-суточного возраста на ОАО «Птицефабрика Кинешемская» Ивановской области. Предприятие благополучно по инфекционным заболеваниям.
Алгоритм проведения исследований представлен на рисунке 1.
Рис 1. Алгоритм научных исследований
Исследования включали несколько этапов:
1. Изучение влияния полиоксидония, АСД Ф-2 и яичного белка на эмбриональное развитие цыплят;
2. Изучение влияния полиоксидония, АСД Ф-2 и яичного белка на резистентность и иммунную защиту, рост и развитие цыплят;
3. Расчёт экономической эффективности применяемых стимуляторов.
В соответствии с поставленными задачами, были проведены 4 научнопроизводственных опыта (табл. 1).
Таблица 1
Схема опытов
1 опыт. Обработка инкубационных яиц полиоксидонием и АСД Ф-2
1 группа (n=145) - аэрозольно 0,06% раствором полиоксидония
2 группа (n=145) - аэрозольно 10% раствором АСД Ф-2
3 группа (n=126) - погружение в 0,06% раствор полиоксидония
4 группа (n=126) - погружение в 10% раствор АСД Ф-2
2 опыт. Обработка инкубационных яиц 0,03% полиоксидонием и 8% АСД Ф-2
5 группа (n=126) - аэрозольно 0,03% раствором полиоксидония
6 группа (n=126) - аэрозольно 8% раствором АСД Ф-2
3 опыт. Обработка инкубационных яиц яичным белком
7 группа (n=126) - аэрозольно 7,5% раствором белка из диетического яйца
8 группа (n=126) - аэрозольно 7,5% раствором белка из столового яйца
9 группа (n=126) - погружение в 7,5% раствор белка из диетического яйца
10 группа (n=126) - погружение в 7,5% раствор белка из столового яйца
4 опыт.
Аэрозольная обработка инкубационных яиц оптимальными концентрациями препаратов11 группа (n=4032) - 0,06% раствором полиоксидония
12 группа (n=4032) - 10% раствором АСД Ф-2
13 группа (n=4032) - 7,5% раствор белка из диетического яйца
14 группа (n=4032) - 7,5% раствор белка из столового яйца
В каждом опыте была контрольная группа, которая обработке не подвергалась
В первых трёх проведённых опытах была установлена оптимальная концентрация и наиболее эффективный способ обработки инкубационных яиц, позволяющий получить высокий результат вывода молодняка.
Для научно-производственного эксперимента были подобраны яйца от кур- несушек родительского стада кросса «Хайсекс браун», с учётом времени их снесения и хранения. Инкубационные яйца отбирали по массе (58-62 г), индексу формы (77,2-80,2%), толщине скорлупы (320 мкм). Группы формировались методом аналогов. Все яйца подвергались первичной дезинфекции.
За два часа до инкубации опытные группы яиц однократно обработали исследуемыми препаратами с помощью струйного аэрозольного генератора (САГ- 1РН) с экспозицией 15-20 минут.
В качестве стимуляторов использовали полиоксидоний, АСД Ф-2, водный раствор яичного белка, приготовленный из диетического яйца и из столового яйца.
Полиоксидоний (Азоксимера бромид) - линейный полимер с молекулярной массой 100 kD. Из инструкции по применению: обладает детоксицирующими, иммуностимулирующими и антиоксидантными свойствами, действует в отношении бактериальных, грибковых и вирусных инфекций, повышая резистентность организма. Выпускают в виде пористой массы белого цвета с желтоватым оттенком во флаконах по 3 или 6 мг. Для приготовления раствора препарат растворяют в дистиллированной воде комнатной температуры и применяют в расчёте 1,5 мл на м (по действующему веществу).
АСД Ф-2 (антисептик стимулятор Дорогова фракция 2) - тканевый лекарственный препарат, является продуктом сухой перегонки сырья животного происхождения. Он содержит низкомолекулярные компоненты, которые по своей структуре аналогичны метаболитам клеточного обмена.
Обладает высокой фармакологической активностью, стимулирует обменные и иммунные процессы в организме, относится к малотоксичным. Для аэрозольного использования рекомендовано применять препарат в виде 10% водного раствора в дозе 5 мл на 3м воздуха.
АСД Ф-2 был взят в качестве прототипа, так как он известен своими иммунологическими свойствами.
Яичный белок - источник протеинов, углеводов, витаминов, минеральных веществ. В его состав входят все незаменимые аминокислоты, более 70 различных ферментов. Протеины яйца (лизоцим, авидин, овотрансферин, овомукоид) обладают наибольшим потенциалом в качестве естественных противомикробных веществ. Для эксперимента был использован 7,5% водный раствор яичного белка
3
из диетического и столового яйца в расчёте 8 мл на м .
Яйца опытных и контрольной групп инкубировали при стандартных режимах в шкафах марки СТИМУЛ ИНК (ИП-16, ИВ-16).
Во время инкубации на 8, 18 и 21 сутки проводился биологический контроль. Стимулирующее действие препаратов на эмбриональное развитие цыплят определяли по потере массы яиц в процессе инкубации (усушка), выводу молодняка и выводимости яиц.
Цыплята, выведенные из обработанных яиц, переводились в цех выращивания молодняка. Цыплята содержались в клеточных батареях КБУ-3 в
о
залах объемом 2000 м .Условия содержания, кормления и ухода для всех групп птиц были одинаковы и соответствовали «Руководству по работе с птицей кросса Хайсекс браун» (2009). Поение осуществляли с помощью проточных поилок. Исследования проводили от момента закладки яиц на инкубацию и до 30- суточного возраста. Последствие влияния препаратов наблюдали до момента яйцекладки.
Отбор материала проводили каждый раз от 15 голов из группы в утренние часы (до кормления).
Вакцинопрофилактику на птицефабрике проводили согласно программе противоэпизоотических мероприятий. В суточном возрасте цыплят вакцинировали против болезни Марека (внутримышечно), инфекционного бронхита кур (спрей-методом); в 10 и 19-суточном возрасте - против болезни Гамборо (методом выпойки); в 20, 45 и 60-суточном возрасте - против ньюкаслской болезни (аэрозольно); в 25, 50 и 70 суток - против инфекционного
бронхита кур (ИБК); в 26-суточном возрасте против оспы (внутрикожно); в 95- суточном возрасте - против синдрома снижения яйценоскости (ССЯ), ИБК и БН (внутримышечно).
Научные исследования проводили с применением следующих методов:
- клинических: ежедневный клинический осмотр птицы с определением состояния здоровья;
- зоотехнических: биологический контроль инкубации; прирост живой массы цыплят по данным индивидуальных взвешиваний в возрасте 1, 10, 20, 30 суток на весах марки VEIT electronics модели BAT1; длины тела в суточном возрасте; сохранности птицы по данным ветеринарной отчетности;
- анатомических: массу органов определяли путем взвешивания на весах Pocker scale (100g x 0.01g); Вычисляли индекс массы органа по формуле I=1000a∕b, где I - индекс массы органа, a - масса органа, г; b - масса тела, г;
- гематологических: подсчёт количества эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева (по К.С. Фоминой, В.И. Шмельковой, 2004), выведение лейкограммы, определение концентрации гемоглобина (гематиновый метод) - по общепринятым методикам;
- местную защиту слизистой оболочки трахеи и состояние резистентности: определение фагоцитарных и адсорбционных свойств слизистой оболочки трахеи (по О.Г. Алексеевой, 1986); уровень процента лизиса микробных тел в сыворотке крови с использованием культуры Micrococcus Iysodeicticus (по И.Б. Храбустовскому и Ю.М. Макарову, 1974);
- иммунологических: определение в сыворотке крови специфических антител (напряженность иммунитета) против ньюкаслской болезни в реакции задержки гемагглютинации (РТГА) со специфическим антигеном;
- биохимических: определение в сыворотке крови общего кальция, неорганического фосфора, общего холестерина, альбумина, глобулина, концентрацию билирубина общего и его фракций - колориметрическим методом на биохимическом анализаторе КФК-2 и Bio ChemBA с набором реактивов для in vitro диагностики фирмы ООО «Ольвекс Диагностикум»; общий белок -
рефрактометрическим методом (П.Т. Лебедев, А.Т. Усович, 1976) с помощью прибора ИРФ-22; содержание витамина А в желтке куриного яйца и печени в пробе с омылением (методом измерения по шкале З.М. Графской).
Проведено исследование 540 проб крови, 300 мазков-отпечатков со слизистой оболочки трахеи.
Для оценки иммунологической эффективности вакцинации против ньюкаслской болезни в поствакцинальный период исследовали каждый раз по 20 проб из каждой группы.
Экономическую эффективность применения стимуляторов рассчитывали по «Методике определения экономической эффективности научноисследовательских и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений» (1980) и методическим указаниям «Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий в животноводстве» (2002).
Полученные результаты подвергались статистической обработке с применением метода Т-Studenta, использованием electronic calculator и стандартной вариационной статистики (программы Microsoft Office Excel-2007).
Еще по теме 2.1. Материалы и методы исследований:
- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
- Материалы и методы исследования.
- Материалы и методы исследования
- Глава 2. Материалы и методы исследования
- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Материалы и методы гигиенического исследования
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Глава II. Материалы и методы исследования.
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ